Швидкий тест на аденовірус – назальна секреція

Передбачуване використання:

Набір для тесту на нуклеїнову кислоту SARS-CoV-2 призначений для якісного виявлення нуклеїнової кислоти COVID-19 у мазках з носоглотки, ротоглотки та мокротиння. Результати тесту є основою для молекулярної діагностики інфекції або підозрюваних пацієнтів і не повинні використовуватися як єдиний критерій для клінічної діагностики.

Матеріали:

Процедура тестування:

A. Пробопідготовка

Екстрагована РНК є вихідним матеріалом для тесту на нуклеїнову кислоту SARS-CoV-2.

Важливо: кожну процедуру екстракції нуклеїнової кислоти необхідно виконувати одночасно з одним позитивним контролем (40 мкл, розвести стерильними сольовими розчинами/PBS до бажаного об’єму) та одним негативним контролем (40 мкл, розвести стерильними сольовими розчинами/PBS до бажаного об’єму).

Рекомендується використовувати такі комерційні набори для вилучення нуклеїнових кислот: PureLinkTM Mini Kit Viral RNA/DNA (Invitrogen); Міні-набір вірусної РНК (QIAGEN); TIANamp Hi-DNA/RNA Kit (TIANGEN);

B. Установка реакційної суміші

1. Перед використанням усі реагенти та зразки слід повністю розморозити, повністю перемішати та коротко центрифугувати при кімнатній температурі (приблизний діапазон від 18 до 25 градусів).

2. Приготуйте необхідний об’єм реакційної суміші в поліпропіленовій мікроцентрифужній пробірці відповідного розміру.

3. Внесіть піпеткою 25 мкл реакційної суміші в кожну необхідну лунку відповідної оптичної 96-реакційної пластини або відповідної оптичної реакційної пробірки.

C. Додавання шаблону

1. Додайте 5 мкл виділеної РНК із зразків/позитивного контролю/негативного контролю. Загальний об’єм 30 мкл.

2. Ретельно перемішайте зразки та контролі з реакційною сумішшю шляхом піпетування вгору та вниз/Вортекс.

3. Закрийте реакційну пластину з 96-лунками відповідними кришками або оптичною клейкою плівкою та реакційні пробірки відповідними кришками.

4. Центрифугувати реакційний планшет з 96-лунками в центрифузі з ротором мікротитраційного планшета протягом 30 секунд при приблизно 2500 об/хв.

D. Програмування приладу ПЛР у реальному часі

Для отримання основної інформації щодо налаштування та програмування різних інструментів ПЛР у реальному часі, будь ласка, зверніться до посібника користувача відповідного інструменту. Аналіз було оптимізовано для системи ПЛР у реальному часі ABI7500. Запуск ПЛР виконується в умовах циклічного циклу, як описано в таблиці нижче.

Визначте детектори флуоресценції

* Будь ласка, встановіть внутрішнє посилання флуоресценції приладу на «Немає», наприклад: Для інструментів серії ABI встановіть «Пасивне посилання» на «Немає».

E. Аналіз даних

Будь ласка, встановіть параметри аналізу та проаналізуйте дані відповідно до інструкцій з експлуатації відповідних приладів.

Візьмемо ABI 7500 як приклад:

Базову лінію слід встановити на діапазон, який усуває фонову флуоресценцію, виявлену на ранніх циклах посилення, але не перекриває область, де сигнали посилення піднімаються над фоном (Початкове значення: 3~10; Кінцеве значення: {{2} }). Поріг циклу (Ct) має бути в основі експоненційної фази. Натисніть «Аналіз», щоб отримати результат аналізу автоматично, і прочитати результат виявлення у вікні «Звіт».

Популярні Мітки: експрес-тест на аденовірус-носовий секрет, Китай, постачальники, виробники, фабрика, гурт